Abstrak: Infeksi merupakan salah satu penyebab utama masalah kesehatan di Indonesia terutama infeksi pada saluran pencernaan yang sering terjadi salah satunya penyakit diare. Ekstrak etanol bawang dayak (Sisyrinchium palmifolium L.) diduga memiliki khasiat sebagai antibakteri karena mengandung alkaloid, fenolik, flavonoid, terpenoid, steroid dan saponin. Penelitin ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas antibakteri bawang dayak (Sisyrinchium palmifolium L.) terhadap bakteri Bacillus cereus ATCC 11778, Escherichia coli ATCC 25022 dan Vibrio cholerae ATCC 14033, menggunakan tiga konsentrasi dari uji yaitu 30%, 19,8% dan 9,9%. Serbuk bawang dayak di ekstraksi dengan metode maserasi menggunakan etanol destilat. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi menggunakan kertas cakram. Hasil penelitian diperoleh rata-rata diameter zona hambat untuk masing-masing konsentrasi laruta uji 30%, 19,8% dan 9,9%. sebesar (14,66 mm, 12,68 mm dan 10,46 mm) pada bakteri Bacillus cereus ATCC 11778, ( 12,61 mm, 11,43 mm 9,36 mm) pada bakteri Escherichia coli ATCC 25022 dan (13,28 mm, 11,71 mm 10,35) pada bakteri Vibrio cholerae ATCC 14033. Pada bakteri Bacillus cereus ATCC 11778 dan Vibrio cholerae ATCC 14033 masing-masing konsentrasi uji dapat diketahui ekstrak etanol bawang dayak sebagai antibakteri yang memiliki daya penghambatan kategori kuat. Pada bakteri Escherichia coli ATCC 25022 konsentrasi laruta uji 30%, 19,8% memiliki daya hambat kategori kuat dan 9.9% memiliki daya hambat kategori sedang.

Kata kunci: Aktivitas antibakteri, diare, bawang dayak (Sisyrinchium palmifolium L.) metode difusi kirby-bauer.