Abstrak : Jamur endofit merupakan salah satu sumber senyawa bioaktif, jamur ini dapat hidup di dalam jaringan tanaman. jamur endofit umumnya memproduksi metabolit sekunder yang memiliki aktivitas biologis yang bermanfaat seperti senyawa anti kanker, antivirus atau anti bakteri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui perbedaan aktivitas antibakteri ekstrak etil asetat dari tiga medium kultivasi jamur endofit G9 akar teratai (Nymphaea nouchali Burm. F) tehadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922. Pengujian aktivitas antibakteri menggunakan metode difusi agar. Ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dan didapatkan ekstrak etil asetat jamur G9 dari tiga medium yang berbeda, medium beras sebanyak 1,2 gram, medium kentang 1,02 gram, dan SDB Saboraud dextrose broth sebanyak 1,4 gram.. Ekstrak etil asetat dari tiga medium kultivasi diuji dengan konsentrasi 5% tehadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 dan Escherichia coli ATCC 25922 kemudian diperoleh diameter zona hambat tehadap bakteri Staphylococcus aureus ATCC 25923 medium beras sebesar 9,6 ± 0,1 , kentang 7,2 ± 0,11, dan SDB 11,4 ± 0,43, pada bakteri Echerichia coli ATCC 25922 medium beras sebesar 9,6 ± 0,36, medium kentang 7,6 ± 0,25 dan medium SDB 11,5 ± 0,41. Dari hasil zona hambat terdapat perbedaan zona hambat terbesar diperoleh dari medium kultivasi SDB (Sabouraud dextrose broth) diduga karena medium SDB menghasilkan pertumbuhan jamur endofit lebih banyak sehingga menghasilkan senyawa alkaloid lebih banyak dibandingkan medium beras dan kentang. rnrnKata kunci : jamur endofit, medium kultivasi, akar teratai,antibakteri.