Abstrak: Telah dilakukan biosintesis dan karakterisasi ZnO nanopartikel dari ekstrak etanol daun jambu biji (Psidium guajava L.), ion Zn2+ serta aplikasinya sebagai antibakteri Eschericia coli. Penelitian ini bertujuan untuk biosintesis dan karakterisasi ZnO nanopartikel serta melihat aktivitas antibakteri nya terhadap Eschericia coli. Karakterisasi menggunakan spektrofotmeter FTIR untuk melihat gugus fungsi yang terbentuk dan diukur ukuran kristalinitasnya menggunakan XRD. Pengujian antibakteri Eschericia coli ATCC25922 dilakukan dengan metode sumuran. Karakterisasi gugus fungsi menunujukkan adanya vibrasi gugus fungsi Zn-O pada bilangan gelombang 677,01 cm-1, 619,15 cm-1 dan 470,63 cm-1. Karakterisasi menggunakan XRD menunjukkan puncak terkuat pada 33,03 dengan rata-rata ukuran kristal 7,0052 nm. Aktivitas antibakteri dari ZnO nanopartikel pada konsentrasi 2500 ppm, 5000 ppm dan 10000 ppm menunjukkan diameter hambat berturut-turut 5,31 mm, 6,74 mm dan 7,21 mm untuk ZnO nanopartikel yang dibiosintesis tanpa penambahan NaOH dan 6,10 mm, 6,64 mm dan 7,25 mm untuk ZnO nanopartikel yang dibiosintesispada pH 8.

Kata kunci : ZnO nanopartikel, Eschericia coli, sumuran